猪肉检测——复达客户检测案例
2022年3月2日,客服中心反馈个人客户想知道自己家买的猪肉有没有寄生虫之类的东西,想确保食入的安全,从而进行检测。
客户是个人客户,想知道他们从市场中购买的猪肉是否有寄生虫之类的东西,客户发现猪肉里有异常,所以想检测一下看有没有问题。
猪肉
检测样品是否有寄生虫之类的东西。
推荐客户测试猪肉中是否有囊尾蚴成分,因为猪肉中常见的寄生虫就是囊尾蚴。
方法和原理:
方法:荧光定量pcr法
原理:荧光定量PCR 所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量 PCR 的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反应体系中,加入过量荧光染料,荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射出荧光信号。前者由于增加了探针的识别步骤,特异性更高,但后者则简便易行。
非特异性SYBR Green I染料法:SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料(结合示意图),在游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强(作用机理图)。因此,SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。
特异性Taqman水解探针法:Taqman荧光定量技术是以Taqman荧光探针为基础,Taqman荧光探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个荧光发射基团和一个荧光淬灭基团。探针完整时,发射基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使荧光发射基团和荧光淬灭基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。从而实现定量。常用的荧光基团是FAM, TET, VIC, HEX。
实验结果
客户对于测试结果和我们技术人员进行探讨、我们相互研究并且给客户提供宝贵的意见。