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脱氢酶活性检测 细胞毒性测定

脱氢酶是一类能催化物质(如糖类、有机酸、氨基酸)进行氧化还原反应的酶,在酶学分类中属于氧化还原酶类。这些酶在反应中被氧化的底物称为氢供体或电子供体,而被还原的底物称为氢受体或电子受体。当受体是氧气时,催化该反应的酶称为氧化酶,其他情况下都称为脱氢酶。不同的脱氢酶几乎都根据其底物的名称命名。生物体中绝大多数氧化还原反应都是在脱氢酶及氧化酶的催化下进行。物质经脱氢酶催化氧化,最后通过电子传递链而被氧氧化,此时通过氧化磷酸化作用生成腺苷三磷酸(ATP),是异养生物体取得能量的主要途径。下面就将对脱氢酶的检测进行详细介绍。

脱氢酶检测机构.png

脱氢酶检测项目

关于脱氢酶,可对其提供活性测定、km值测定、含量测定、吸光度测定、漏出率测定、比活力测定、细胞毒性测定、波长测定等检测项目。

同时可对乳酸脱氢酶、乙醛脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、磷酸脱氢酶等进行检测。

脱氢酶检测方法

脱氢酶的测定方法主要包括活性污泥脱氢酶活性的测定和乳酸脱氢酶(LDH)的测定。活性污泥脱氢酶活性的测定旨在评价工业废水的生物可降解性,通过测定活性污泥在不同工业废水中脱氢酶活性的变化情况来评价工业废水成分的毒性。这种方法基于脱氢酶是一类氧化还原酶,能够催化氢从被氧化的物体转移到另一个物体上,通过指示剂的还原变色速度来确定脱氢过程的强度。常用的指示剂有2,3,5三苯基四氮唑氯化物(TTC)或亚甲蓝,它们在接受脱氢酶活化的氢而被还原时具有稳定的颜色,通过比色的方法测量反应后颜色深度来推测脱氢酶的活性。12

乳酸脱氢酶(LDH)的测定方法则更加具体,包括实验前的试剂配置、加样、温育、洗板、显色和测量光密度值等步骤。这种方法通常使用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,通过生物素标记抗体和辣根过氧化物酶标记亲和素工作液的添加,以及底物溶液的显色反应,最后测量各孔的光密度(OD)值来定量分析LDH的活性。

此外,乳酸脱氢酶同工酶的测定方法包括电泳法、离子交换柱层析法、免疫法、抑制法和酶切法等多种方法,这些方法能够分离和测定LDH的不同亚型,从而提供更详细的信息关于LDH在特定生理或病理条件下的作用。

脱氢酶检测标准(部分)

1、DB34/T 1729-2012 窖泥中脱氢酶活性的分析方法

2、WS/T 361-2011 乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法 

3、BS EN ISO 23753-2:2011 土壤质量.土壤中的脱氢酶活性测定.氯化四氮唑法(INT)

4、KS I ISO 23753-2-2006(2016 土壤质量土壤脱氢酶活性的测定第2部分:氯化碘三唑法

5、ISO 18187:2024 土壤质量 利用土壤脱氢酶活性对固体样品进行接触试验

6、UNE 81592:1991 生物控制 血液中 Δ-氨基酮酸脱氢酶(ALA-D)活性的测定 光谱法

7、KS I ISO 23753-2:2006 土壤质量.土壤中脱氢酶活性的测定.第2部分:氯化四氮唑法(INT)

8、BS EN ISO 23753-2:2019+A1:2020 土壤质量 土壤中脱氢酶活性的测定 使用氯化碘四唑 (INT) 的方法

9、BS EN ISO 18187:2018 土壤质量 利用球形节杆菌脱氢酶活性进行固体样品接触测试

10、KS I ISO 23753-1-2006(2016 土壤质量土壤脱氢酶活性的测定第1部分:氯化三苯基四氮唑(TTC)法

11、ISO 23753-2:2019 土壤质量.土壤中脱氢酶活性的测定.第2部分:碘特拉唑氯化物(INT)法

12、BS EN ISO 18187:2024 土壤质量 利用球形节杆菌脱氢酶活性进行固体样品接触试验

关于脱氢酶检测的相关介绍到此,上海复达检测技术集团有限公司提供成分配方分析、理化测试、有毒有害物质检测、司法鉴定、产品研发等服务,拥有CMA、CNAS等资质。欢迎您的咨询。