灭活效果测试——复达客户检测案例
2021年12月25日,客服中心反馈眉山市某中药材有限公司关于中药艾条的检测,接到反馈后,实验室工程师第一时间与客户进行详细沟通,情况如下:
客户是一家中药材公司,想要对自己家的中药艾条结核杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌灭活效果进行检测,通过网络平台找到我们,咨询具体项目并出具专业的第三方检测报告。
中药艾条
根据客户提供的样品,确定样品具体测试的条件时间和项目,然后提供相关的样品进行测试,出具专业的第三方检测报告。
沟通客户寄送样品,实验室接收到样品及说明书后开始进行最终的确认测试。客户提供的测试要求相对而言比较严格,收到样品后我们立刻沟实验室进行测试的协调,实验中我们使用了不同菌种、不不同模拟环境进行测试。从而顺利进行测试。同时针对客户的要求我们进行了多次模拟
测试项目:根据样品说明书确定了测试项目:有结核杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌灭活效果,部分测试结果如下:
测试结果
一、菌株:
大肠杆菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 6538、龟分支杆菌脓肿亚种ATCC 93326
二、菌液的制备:
取菌种第5代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌24h,龟分枝杆菌脓肿亚种72h),用5.0ml吸管吸取3.0 ml~5.0ml稀释液加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中,用旋涡振荡器混合(振荡)20s(龟分支杆菌脓肿亚种ATCC 93326振荡5min),以使细菌悬浮均匀。初步制成的菌悬液,先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度,然后以稀释液稀释为108cfu/mL。
三、试验程序
试验方法:参考《消毒技术规范》2002年版 2.1.5.2.4 大肠杆菌杀灭试验
试验过程:
1.菌片的制备:载体片(定性滤纸片)大小10mm×10mm,将经灭菌的载体片平铺于无菌平皿内,逐片滴加菌液。菌液滴加量每片为10μl。用10μl移液器接灭菌塑料吸头滴染菌液,并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后,染菌载体可置37°℃温箱内干燥(约20min~30min)后再使用。
2. 菌片回收:取1菌片,放入到5ml0.9%氯化钠溶液中,振荡混匀,取0.5ml混合液加到4.5ml 0.9%氯化钠溶液中,10倍稀释至适宜浓度,取1ml进行活菌培养计数。菌片回收菌量应在5*105~5*106cfu/片范围内。
3. 杀灭程序:在生物安全柜中进试验,试验装置包括燃烧舱(60L)和试验舱(60L),将样品在燃烧舱燃烧产生烟熏烟雾,在试验舱加一抽气泵将烟熏烟雾抽至实验舱,调节流量计为5L/min(标准大气压),对放置在试验舱中的菌片进行杀灭。
4. 试验程序:
试验组:每个菌株分别取两片菌片置一无菌平皿中,共3个平皿,移至试验舱中用烧杯垫高至中间位置。剂量设计为两组,一组只燃烧一半长度的样品,一组燃烧整只样品。样品燃烧到制定位置时,熄灭样品,继续通气至试验舱无烟雾,停止通气,打开舱门,取出菌片,放入到含5ml营养肉汤试管中,混匀,作梯度稀释,各稀释度取1mL悬液做活菌培养计数,37℃培养(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养48h,龟分枝杆菌脓肿亚种培养7天)。
阳性对照组:将未杀灭的两片菌片,置一无菌平皿中,放置于生物安全柜,待试验组杀灭完毕后,取出菌片,放入到含5ml营养肉汤试管中,混匀,作梯度稀释,各稀释度取1mL悬液做活菌培养计数,37℃培养(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌48h,龟分枝杆菌脓肿亚种7天)。
阴性对照组:将空白载体样品放入5ml营养肉汤试管,混匀,置37℃培养(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养48h,龟分枝杆菌脓肿亚种培养7天)。
重 复:试验重复3次。阴性对照组应无菌生长,每次阳性对照回收菌数应达到5*105~5*106cfu/片。
四、结果
剂量组1,燃烧一半长度的样品的杀灭试验结果见表1;剂量组2,(燃烧整支长度)杀灭试验试验结果见表2。
五、结论
在本次试验条件下,中药艾条在燃烧一半时和燃烧一整支时对大肠杆菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 6538、龟分支杆菌脓肿亚种ATCC 93326杀灭率均大于99%。
客户收到报告后非常满意我们的专业程度,并为我们的服务提出的大大的好评。