2021年12月27日，上海某大学电话咨询我司相对于他们研发的化妆品修护的功效检测

客户背景

客户是上海某大学技术人员。新研发的产品需要备案做个预实验看下修护功效，希望我们协助测试

样品名称

护肤乳

解决方案

1.实验材料：

1.1细胞系：人永生化角质细胞

1.2培养基：含 10%胎牛血清（FBS）的 MEM 培养基，2-8℃保存 2 周

1.3 测试条件：温度 37±0.5℃，湿度>90% ，5% CO2 浓度

1.4  溶液及对照：阴性对照组（NC）：含 0.4%FBS 的 MEM 培养基阳性对照组（PC）：含 10%FBS 的 MEM 培养基

待测物质（TA）：用 0.4%FBS 的 MEM 培养基稀释至测试浓度

2.试验步骤：

2.1细胞活性测试

2.1.1细胞常规培养。制备细胞悬液，将细胞悬液接种于 96 孔细胞培养板，培养。

2.1.2弃去孔中原培养液，每孔加入不同浓度的测试样品，返回培养箱孵育。

2.1.3取出培养板，每孔加入MTT 溶液，培养箱孵育。去除孔中液体，每孔加入 DMSO，置于振荡器振荡后， 在酶标仪测定吸光度。

2.1.4数据分析：细胞活性以阴性对照组的细胞活性为 100%，计算各组相对细胞活性（Viability）。

2.2细胞迁移测试

2.2.1常规培养细胞，使用带有 2 孔插入物的 24 孔细胞培养板，每孔接种，返回培养箱培养至细胞融合。

2.2.2小心用镊子取出培养板中的培养插入物，培养插入物 2 孔之间形成一道平整的无细胞区域。用 PBS 清洗细胞层 3 次，去除脱落的细胞。

2.2.3每孔加入 1 mL 含不同浓度的测试样品的培养液，同时在镜下采集图像，记为 0 h，标记所采集的位置。

2.2.4每隔 24 h，在所标记的相同位置，采集图片，记为 24 h 和 48 h。

2.2.5数据分析：采用IPP 图像分析软件，分析每个图像划痕区域的面积，以 0 h 为 100%，计算相对面积。

3.试验结果：

3.1细胞活性测试

经由客户同意后，筛选三个浓度作为后续功效实验测试浓度。

3.2细胞迁移测试

在 3.2 测试条件下，24 h 时，与阴性对照组相比，阳性对照组迁移修复的速率明显加快(P<0.05)；样品组三个浓度均比阴性对照组迁移修复快(P<0.05)。48h 时，各组迁移面积基本修复完全。

客户反馈

客户对于测试结果和我们技术人员进行探讨、我们相互研究并且给予了客户原始平行数据，误差范围。并且后续要求我们对其采集的样品定期检测。