溶血性链球菌检测机构
链球菌常根据其在血琼脂培养基上溶血环的大小,分为甲、乙、丙三型。其中乙型溶血性链球菌具有完全的溶血性,菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环,这类细菌称为溶血性链球菌。
溶血性链球菌在自然界中分布较广,是一种常见的病原微生物,呈球形或椭圆形,直径0.6-1.0μm,呈链状排列,长短不一,从4-8个至20-30个菌细胞组成不等,链的长短与细菌的种类及生长环境有关。该菌不形成芽孢,无鞭毛,易被普通的碱性染料着色,革兰氏阳性,需氧或兼性厌氧菌,营养要求较高。下面就将对溶血性链球菌的检测进行详细介绍。
关于溶血性链球菌,可对其β-溶血素、抗酸性酶、蛋白酶、DN酶、酰胺酶、葡萄糖酸激酶、血清型、丝状素、抗原、核酸酶、羟丁酸脱氢酶、四醇激酶、尿素酶、乳酸脱氢酶、小分子蛋白质、外毒素、PG豁免物、分子情况、脱氧琼脂糖酶、重组毒素提供等检测项目。
同时可对α型链球菌、β型链球菌、γ型链球菌、δ型链球菌、ε型链球菌、ζ型链球菌、弧菌属、葡萄球菌属、链霉菌属、放线菌属、肺炎链球菌、嗜血杆菌属、流感嗜血杆菌、链球菌属、环球菌属、葡萄链霉菌属、巨大微球菌属、鼠疫杆菌属、麻风杆菌属等进行检测。
1、样品处理:取25g固体(或25mL液体)检样加入225mL灭菌生理盐水,制成混悬液。
2、吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤,或直接划线于血平板(如检样污染严重,可同时接种5mL至匹克氏肉汤),36℃培养24h,接种血平板,36℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血平板上分纯,观察在液体和固体中的培养特征、溶血情况及革兰氏染色、形态,并进行链激酶试验和杆菌肽敏感试验。
3、链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mL灭菌生理盐水,混匀,再加入链球菌18-24h 36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL,混匀,置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固,观察凝块重新完全溶解的时间,完全溶解为阳性,如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。
4、杆菌肽敏感试验:取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上,36℃培养18-24h,如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照。
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2、GB/T 18203-2000 室内空气中溶血性链球菌卫生标准
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11、SN/T 2754.9-2011 出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法.第9部分:溶血性链球菌
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